Estudio de la actividad enzimática de la enzima comercial papaína a diferentes pH, temperatura y concentración de sustrato

Abstract

La presente investigación tuvo como objetivo el estudio de la actividad enzimática de la enzima comercial papaína a diferentes pH, temperatura y concentración de sustrato. El tipo de investigación fue experimental, estuvo compuesta por 180 g de caseína, la enzima papaína comercial 96 g que se dividió en 2 g por cada ensayo. Se manipularon variables independientes, el pH, la temperatura y la concentración de sustrato, la variable dependiente fue la actividad enzimática medida mediante espectrometría UV en función de los cambios aplicados a las condiciones experimentales. Los resultados obtenidos a diferentes pH muestran que tanto el sustrato y el pH actúan de manera independiente, en pH de 6 a 7 se evidenció una mínima interacción. A temperatura de 65 °C, la actividad enzimática incrementó progresivamente hasta alcanzar su capacidad máxima. Posteriormente, se evaluó la influencia de la concentración de sustrato bajo condiciones de pH 7 y 50 °C, observándose un mayor consumo de oxígeno y mayor velocidad de reacción en concentraciones de 18,75 mM y 20,83 mM. El modelo Michaelis-Menten permitió describir adecuadamente el comportamiento cinético de la enzima, obteniéndose un coeficiente de determinación R² = 0.9863 lo que evidenció un ajuste confiable del modelo. Los parámetros cinéticos obtenidos fueron Kₘ = 36.65 mM y de Vmax = 0.015785 mmol/min, lo que indicaron una baja afinidad de la enzima por el sustrato en su forma comercial. Estos resultados permiten comprender las condiciones óptimas para el uso eficiente de la papaína en procesos industriales que requieren degradación de proteínas.